核酸检测的原理是什么?DNA和RNA怎么区分?什么是假阴性

如今,疾病越来越复杂多样,而疾病的检测以及甄别对于治疗来说就显得至关重要了,就拿这次新冠肺炎的爆发来说,其中“核酸检测”这种医学检测手段就进入了大众的视野。那么,核酸检测技术的原理是什么?为什么核酸检测会有的一定几率出错?什么是假阴性?

核酸。

核酸作为一个比较大的概念,分为脱氧核糖核酸,以及核糖核酸,其中脱氧核糖核酸是我们日常生活中所说的基因,即DNA,一般以细胞为单位的生命体的遗传信息都是以脱氧核糖核酸的形式被储存在DNA里的,但是病毒的遗传方式有所不同,比如有一部分病毒是以脱氧核糖核酸为遗传物质的(乙肝病毒)。

但是普遍的DNA病毒致病性不同,一般常见的致病性病毒的遗传物质是一种叫做RNA的物质,即核糖核酸。

总之,核酸就是在细胞核里面的一类生物聚合物,是遗传物质的最小单位核苷酸或者碱基所组成的序列,参与着遗传物质保存、繁殖等生化合成和细胞代谢,决定着细胞或机体的性状表现。

自1953年DNA双螺旋结构的发现,正式开启了分子生物学时代,使人类对病原体的研究从形态学层次深入到了分子层次,而核酸检测技术就是基于分子水平的一项检测技术。

核酸检测技术

简单来说,由于每一个生物的核酸是不一样的,因此可以通过分析致病微生物核酸内部的基因学序列,来确定生物体上是否携带有病毒。

核酸检测技术是基于核酸双链互补配对原则的核酸杂交技术,首先合成一段与特定病原体DNA或者RNA互补的单链核酸序列作为探针,并用生物素、放射性同位素、酶等进行标记,然后与待测病原体的核酸进行杂交。如果探针能与待测病原体的核酸互补配对,便能观察到标记物的信号,以此来证实待测病原体的种类。

当探针与病原体核酸互补结合后,探针上的标记物便会显色,研究人员就通过观察病原体样本是否显色来确定病原体的种类,但是有时候会因为患者体内的病原体核酸含量过低,检测时会有一定的难度。

直到20 世纪八九十年代,PCR 技术的出现才大大提高了核酸检测技术的应用性和准确性。核酸检测技术不必预先对病原体进行分离培养便可直接检测,方便快捷,而且特异度和灵敏度均较高,对感染性疾病的早期诊断有至关重要的意义。

对于核酸检测的价格各个地方略有不同,一般做一次核酸检测可能需要200到300元左右,一般24小时内就可以得出结果。

虽然核酸检测技术已经相当成熟,但自新冠肺炎疫情发生以来,关于核酸检测的假阴性率过高的这个话题,一直都是各方关注的焦点。

比如在北京大学国际医院一名急诊护士在6月18日确诊感染新冠肺炎,但6月17日她曾参加的核酸检测结果却为阴性,这个结果也让众人对核酸检测技术提出了质疑。

假阴性、假阳性

假阳性是指本来的阴性样品结果检测为了阳性,即错检;假阴性是指本来的阳性样品检测为阴性,即漏检。

实际上,从技术角度上来说,核酸检测过程中出现的“假阴性”是不可避免的,比如有项研究就发现,新冠患者在感染期间至少会有20%的漏诊概率,即会出现假阴性结果。虽然核酸检测技术会有假阴性的问题出现,但我们对于核酸假阴性也不能掉以轻心。